medlitГигиена и санитарияHygiene and Sanitation0016-99002412-0650Federal Scientific Center of Hygiene named after F.F. Erisman10.47470/0016-9900-2024-103-10-1235-1242pjuahpmedlit-4426Research ArticleПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ТОКСИКОЛОГИЯ И ГИГИЕНИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕPREVENTIVE TOXICOLOGY AND HYGIENIC STANDARTIZATIONИнтерпретация сдвигов значений некоторых показателей цитомного анализа буккальных эпителиоцитовInterpretation of shifts in the values ​​of some indices of cytome analysis of buccal epithelial cellshttps://orcid.org/0000-0003-4377-245XЮрченкоВалентина ВасильевнаYurchenkoValentina V.

Канд. мед. наук, вед. науч. сотр. отд. профилактической токсикологии и медико-биологических исследований ФГБУ «ЦСП» ФМБА России, 119121, Москва, Россия

e-mail: VYurchenko@cspmz.ru

DSc (Medicine), leading researcher of the Department of Preventive Toxicology and Biomedical Studies of the Centre for Strategic Planning of the Federal medical and biological agency, Moscow, 119121, Russian Federation

e-mail: VYurchenko@cspmz.ru

VYurchenko@cspmz.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3619-3858АхальцеваЛюдмила ВячеславовнаAkhaltsevaLyudmila V.

Канд. биол. наук, ст. науч. сотр. отд. профилактической токсикологии и медико-биологических исследований ФГБУ «ЦСП» ФМБА России, 119121, Москва, Россия

e-mail: LAhalceva@cspmz.ru

PhD (Biology), senior researcher of the Department of Preventive Toxicology and Biomedical Studies of the Centre for Strategic Planning of the Federal medical and biological agency, Moscow, 119121, Russian Federation

e-mail: LAhalceva@cspmz.ru

LAhalceva@cspmz.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5039-8980КривцоваЕлена КонстантиновнаKrivtsovaElena K.

Кауч. сотр. отд. профилактической токсикологии и медико-биологических исследований ФГБУ «ЦСП» ФМБА России, 119121, Москва, Россия

e-mail: E.K.Krivcova@mail.ru

Researcher of the Department of Preventive Toxicology and Biomedical Studies of the Centre for Strategic Planning of the Federal medical and biological agency, Moscow, 119121, Russian Federation

e-mail: E.K.Krivcova@mail.ru

E.K.Krivcova@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2262-6800ИнгельФаина ИсааковнаIngelFaina I.

Доктор биол. наук, вед. науч. сотр. отд. профилактической токсикологии и медико-биологических исследований ФГБУ «ЦСП» ФМБА России, 119121, Москва, Россия

e-mail: FIngel@cspfmba.ru

DSc (Biology), leading researcher of the Department of Preventive Toxicology and Biomedical Studies of the Centre for Strategic Planning of the Federal medical and biological agency, Moscow, 119121, Russian Federation

e-mail: FIngel@cspfmba.ru

FIngel@cspfmba.ruФГБУ «Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью» Федерального медико-биологического агентстваRussian Federation2024191120241031012351242Copyright © Юрченко В.В., Ахальцева Л.В., Кривцова Е.К., Ингель Ф.И., 20242024Юрченко В.В., Ахальцева Л.В., Кривцова Е.К., Ингель Ф.И.Yurchenko V.V., Akhaltseva L.V., Krivtsova E.K., Ingel F.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.rjhas.ru/jour/article/view/4426Введение

Введение. Учёт микроядер (МЯ) в эпителии слизистой оболочки щеки широко используют для оценки воздействия на человека генотоксичных факторов. Цитомный анализ делает тест более чувствительным при выявлении факта экспозиции, но отнести сдвиги отдельных показателей к проявлению токсичности или генотоксичности сложно. Мы предположили, что анализ частот разных форм аномалий ядра в клетках разной степени зрелости может продвинуть наше понимание биологического смысла сдвигов этих показателей.

Материалы и методы

Материалы и методы. Проведён цитомный анализ с учётом степени зрелости эпителиоцитов в соскобах слизистой оболочки щеки детей 6–7 лет и для сравнения в уротелии мышей и крыс в контроле и после применения индуктора цистита и стандартного мутагена циклофосфамида (ЦФ).

Результаты

Результаты. В соскобах слизистой оболочки щеки у детей частота клеток с конденсированным хроматином в ядре, кариорексисом и кариопикнозом существенно повышалась в промежуточных клетках, а частота двуядерных клеток (ДК), клеток с ядерными почками (ЯП) и кариолизисом — только по достижении терминально дифференцированного состояния. Анализ суспензионных препаратов эпителия мочевого пузыря лабораторных животных подтвердил преимущественное накопление ДК в поверхностных слоях. На модели цистита у крыс, вызванного однократным введением ЦФ в дозе 30 мг/кг, наблюдалось снижение частоты ДК в конце пролиферативной фазы посттравматической регенерации эпителия (14 дней после применения ЦФ). После выпаивания мышам ЦФ в дозе 1,3 мг/кг/сут в течение 14 дней среди наиболее зрелых клеток было отмечено повышение частоты ДК.

Ограничение исследования — отсутствие оценки содержания ДНК в ядрах эпителиоцитов, не позволившее оценить формы полиплоидии, отличные от абортивного цитокинеза (эндоциклирование и эндомитоз).

Заключение

Заключение. Получено подтверждение релевантности трактовки повышения частоты ДК в буккальных эпителиоцитах экспонированных людей как проявления генотоксического воздействия. Снижение частоты ДК в ряде случаев может быть связано с восстановительной посттравматической регенерацией эпителия.

Соблюдение этических стандартов. Обследование детей (отбор проб слущивающегося эпителия щеки выполняли неинвазивным методом) проведено с соблюдением норм и правил, закреплённых в Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации с разрешения и в присутствии родителей, заполнивших бланк добровольного информированного согласия на обследование своих детей. Эксперименты проведены в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS N 123), директивой Европейского парламента и Совета Европейского союза 2010/63/ЕС от 22.09.2010 г. о защите животных, используемых для научных целей.

Участие авторов

Участие авторов: Юрченко В.В. — анализ и интерпретация данных литературы, взятие проб эпителиоцитов, приготовление препаратов для цитомного анализа, статистический анализ и описание результатов цитомного анализа, написание текста; Ахальцева Л.В. — поиск и анализ данных литературы, микроскопический анализ мазков слизистой оболочки детей, редактирование рукописи и подготовка её к печати; Кривцова Е.К. — микроскопический анализ суспензионных препаратов мочевого пузыря мышей и крыс; Ингель Ф.И. — обсуждение и редактирование рукописи. Все соавторы — утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи.

Конфликт интересов

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов в связи с публикацией данной статьи.

Финансирование

Финансирование. Работа выполнена в рамках государственного задания «Анализ изменений адаптации у населения, проживающего в районах размещения предприятий — источников запаха, с целью разработки рекомендаций для органов здравоохранения по управлению риском возникновения экологически обусловленных заболеваний».

Поступила

Поступила: 05.07.2024 / Принята к печати: 02.10.2024 / Опубликована: 19.11.2024

Introduction

Introduction. Accounting for micronuclei (MN) in the epithelium of the buccal mucosa is widely used to identify human exposure to genotoxic factors. Cytome analysis makes the test more sensitive to detect exposure, but it remains difficult to attribute changes in individual indices to toxicity or genotoxicity. We hypothesized that analysis of the frequencies of different forms of nuclear abnormalities in cells of different degrees of maturity could promote our understanding of the biological meaning of shifts in these indicators.

Materials and methods

Materials and methods. A cytome analysis was carried out taking into account the degree of maturity of epithelial cells in scrapings of the cheek mucosa in 6–7 years children, and, for comparison, in the urothelium of mice and rats in the control and after the administration of a cystitis inducer and the standard mutagen cyclophosphamide (CP).

Results

Results. In scrapings of the buccal mucosa from children, the frequency of cells with condensed chromatin in the nucleus, karyorrhexis and karyopyknosis increased significantly in intermediate cells, and the frequency of binuclear cells (BN), cells with nuclear buds (NB) and karyolysis increased only upon reaching a terminally differentiated state. Analysis of suspension preparations of the bladder epithelium in laboratory animals confirmed the predominant accumulation of BN in the superficial layers. In a model of cystitis in rats caused by a single administration of CP at a dose of 30 mg/kg, a decrease in the frequency of BN was observed at the end of the proliferative phase of post-traumatic epithelial regeneration (14 days after CP administration). After feeding mice with CP at a dose of 1.3 mg/kg/day for 14 days, an increase in the frequency of BN was noted among the most mature cells.

Limitation of the study is the lack of assessment of the DNA content in the nuclei of epithelial cells, which did not allow evaluating forms of polyploidy other than abortive cytokinesis (endocycling and endomitosis).

Conclusion

Conclusion. There was received confirmation of the relevance of interpretation the increase in the frequency of BNs in buccal epithelial cells in a group of exposed people as a manifestation of genotoxic effects; a decrease in the frequency of BNs in some cases may be associated with post-traumatic regeneration of the epithelium.

Compliance with ethical standards. The examination of children (sampling of desquamated buccal epithelium was carried out using a non-invasive method) in compliance with the norms and regulations enshrined in the Declaration of Helsinki of the World Medical Organization with the permission and in the presence of parents who filled out a voluntary informed consent form for the examination of their children. The study carried out under the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experiments or Other Scientific Purposes (ETS N 123), Directive of the European Parliament and Council of the European Union 2010/63/EU of 22.09.2010 on the protection of animals used for scientific purposes.

Contribution

Contribution: Yurchenko V.V. — analysis and interpretation of literature data, sampling of epithelial cells, preparation of preparations for cytome analysis, statistical analysis and description of the results of cytome analysis, writing an article; Akhaltseva L.V. — search and analysis of literature data, microscopic analysis of smears of the mucous membrane of children, manuscript editing and preparing for publication; Krivtsova E.K. — microscopic analysis of suspension preparations of the bladder of mice and rats; Ingel F.I. — discussion and editing of the manuscript. All authors are responsible for the integrity of all parts of the manuscript and approval of the manuscript final version.

Conflict of interest

Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Acknowledgment

Acknowledgment. The work was carried out within the framework of the state assignment “Analysis of adaptation changes in the population living in areas where odor sources are located, with the aim of developing recommendations for health authorities on managing the risk of environmentally related diseases”.

Received

Received: July 5, 2024 / Accepted: October 2, 2024 / Published: November 19, 2024

соскобы слизистой оболочки щеки человекамикроядерный тестцитомный анализуротелий млекопитающихдвуядерные клеткиscrapings of the mucous membrane of the cheekmicronucleus testcytome analysismammalian urotheliumbinucleate cellsReferencesSanz-Gómez N., de Pedro I., Ortigosa B., Santamaría D., Malumbres M., de Cárcer G., et al. Squamous differentiation requires G2/mitosis slippage to avoid apoptosis. Cell Death Differ. 2020; 27(8): 2451–67. https://doi.org/10.1038/s41418-020-0515-2Sanz-Gómez N., de Pedro I., Ortigosa B., Santamaría D., Malumbres M., de Cárcer G., et al. Squamous differentiation requires G2/mitosis slippage to avoid apoptosis. Cell Death Differ. 2020; 27(8): 2451–67. https://doi.org/10.1038/s41418-020-0515-2Быкова И.А., Агаджанян А.А., Банченко Г.В. Цитологическая характеристика отпечатков слизистой оболочки полости рта с применением индекса дифференцировки клеток. Лабораторное дело. 1987; (1): 33–5.Bykova I.A., Agadzhanyan A.A., Banchenko G.V. Cytological characteristics of imprints of the oral mucosa using the cell differentiation index. Laboratornoe delo. 1987; (1): 33–5. (in Russian)Диденко И.Ю., Петров А.В., Спицин В.В. Структурно-функциональная организация слизистой оболочки полости рта у человека в норме. Журнал анатомии и гистопатологии. 2012; 1(4): 9–24. https://elibrary.ru/pvdslvDidenko I.Yu., Petrov A.V., Spitsin V.V. Structural and functional organization of human oral cavity mucous membrane in the norm. Zhurnal anatomii i gistopatologii. 2012; 1(4): 9–24. https://elibrary.ru/pvdslv (in Russian)Liu Y., Sundqvist K., Belinsky S.A., Castonguay A., Tjälve H., Grafström R.C. Metabolism and macromolecular interaction of the tobacco-specific carcinogen 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone in cultured explants and epithelial cells of human buccal mucosa. Carcinogenesis. 1993; 14(11): 2383–8. https://doi.org/10.1093/carcin/14.11.2383Liu Y., Sundqvist K., Belinsky S.A., Castonguay A., Tjälve H., Grafström R.C. Metabolism and macromolecular interaction of the tobacco-specific carcinogen 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone in cultured explants and epithelial cells of human buccal mucosa. Carcinogenesis. 1993; 14(11): 2383–8. https://doi.org/10.1093/carcin/14.11.2383Vondracek M., Xi Z., Larsson P., Baker V., Mace K., Pfeifer A., et al. Cytochrome P450 expression and related metabolism in human buccal mucosa. Carcinogenesis. 2001; 22(3): 481–8. https://doi.org/10.1093/carcin/22.3.481Vondracek M., Xi Z., Larsson P., Baker V., Mace K., Pfeifer A., et al. Cytochrome P450 expression and related metabolism in human buccal mucosa. Carcinogenesis. 2001; 22(3): 481–8. https://doi.org/10.1093/carcin/22.3.481Spivack S.D., Hurteau G.J., Jain R., Kumar S.V., Aldous K.M., Gierthy J.F., et al. Gene-environment interaction signatures by quantitative mRNA profiling in exfoliated buccal mucosal cells. Cancer Res. 2004; 64(18): 6805–13. https://doi.org/10.1158/0008-5472.can-04-1771Spivack S.D., Hurteau G.J., Jain R., Kumar S.V., Aldous K.M., Gierthy J.F., et al. Gene-environment interaction signatures by quantitative mRNA profiling in exfoliated buccal mucosal cells. Cancer Res. 2004; 64(18): 6805–13. https://doi.org/10.1158/0008-5472.can-04-1771Wang J., Batourina E., Schneider K., Souza S., Swayne T., Liu C., et al. Polyploid superficial cells that maintain the urothelial barrier are produced via incomplete cytokinesis and endoreplication. Cell Rep. 2018; 25(2): 464–77.e4. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2018.09.042Wang J., Batourina E., Schneider K., Souza S., Swayne T., Liu C., et al. Polyploid superficial cells that maintain the urothelial barrier are produced via incomplete cytokinesis and endoreplication. Cell Rep. 2018; 25(2): 464–77.e4. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2018.09.042Birder L.A., Kullmann F.A. Role of neurogenic inflammation in local communication in the visceral mucosa. Semin. Immunopathol. 2018; 40(3): 261–79. https://doi.org/10.1007/s00281-018-0674-0Birder L.A., Kullmann F.A. Role of neurogenic inflammation in local communication in the visceral mucosa. Semin. Immunopathol. 2018; 40(3): 261–79. https://doi.org/10.1007/s00281-018-0674-0Fukushima S., Arai M., Cohen S.M., Jacobs J.B., Friedell G.H. Scanning electron microscopy of cyclophosphamide-induced hyperplasia of the rat urinary bladder. Lab. Invest. 1981; 44(2): 89–96.Fukushima S., Arai M., Cohen S.M., Jacobs J.B., Friedell G.H. Scanning electron microscopy of cyclophosphamide-induced hyperplasia of the rat urinary bladder. Lab. Invest. 1981; 44(2): 89–96.Choi S.H., Byun Y., Lee G. Expressions of uroplakins in the mouse urinary bladder with cyclophosphamide-induced cystitis. J. Korean Med. Sci. 2009; 24(4): 684–9. https://doi.org/10.3346/jkms.2009.24.4.684Choi S.H., Byun Y., Lee G. Expressions of uroplakins in the mouse urinary bladder with cyclophosphamide-induced cystitis. J. Korean Med. Sci. 2009; 24(4): 684–9. https://doi.org/10.3346/jkms.2009.24.4.684Abraham P., Rabi S. Protein nitration, PARP activation and NAD+ depletion may play a critical role in the pathogenesis of cyclophosphamide-induced hemorrhagic cystitis in the rat. Cancer Chemother. Pharmacol. 2009; 64(2): 279–85. https://doi.org/10.1007/s00280-008-0868-6Abraham P., Rabi S. Protein nitration, PARP activation and NAD+ depletion may play a critical role in the pathogenesis of cyclophosphamide-induced hemorrhagic cystitis in the rat. Cancer Chemother. Pharmacol. 2009; 64(2): 279–85. https://doi.org/10.1007/s00280-008-0868-6Tolbert P.E., Shy C.M., Allen J.W. Micronuclei and other nuclear anomalies in buccal smears: methods development. Mutat. Res. 1992; 271(1): 69–77. https://doi.org/10.1016/0165-1161(92)90033-iTolbert P.E., Shy C.M., Allen J.W. Micronuclei and other nuclear anomalies in buccal smears: methods development. Mutat. Res. 1992; 271(1): 69–77. https://doi.org/10.1016/0165-1161(92)90033-iBolognesi C., Knasmueller S., Nersesyan A., Thomas P., Fenech M. The HUMNxl scoring criteria for different cell types and nuclear anomalies in the buccal micronucleus cytome assay – an update and expanded photogallery. Mutat. Res. 2013; 753(2): 100–13. https://doi.org/10.1016/j.mrrev.2013.07.002Bolognesi C., Knasmueller S., Nersesyan A., Thomas P., Fenech M. The HUMNxl scoring criteria for different cell types and nuclear anomalies in the buccal micronucleus cytome assay – an update and expanded photogallery. Mutat. Res. 2013; 753(2): 100–13. https://doi.org/10.1016/j.mrrev.2013.07.002Кирсанов К.И., Сычева Л.П., Лесовая Е.А., Жидкова Е.М., Власова О.А., Осипова А.В. и др. Применение буккального микроядерного цитомного теста для оценки цитогенетического статуса медперсонала, контактирующего с противоопухолевыми препаратами. Генетика. 2022; 58(5): 530–9. https://doi.org/10.31857/S0016675822050058 https://elibrary.ru/ugcyjqKirsanov K.I., Lesovaya E.A., Zhidkova E.M., Vlasova O.A., Osipova A.V., Lylova E.S., et al. Buccal micronucleus cytome assay for the evaluation of cytogenetic status of healthcare professionals contacting with anti-cancer drugs. Genetika. 2022; 58(5): 530–9. https://doi.org/10.1134/S1022795422050052 https://elibrary.ru/hyxjaf (in Russian)Ингель Ф.И., Юрченко В.В., Ахальцева Л.В., Кривцова Е.К., Коняшкина М.А., Юрцева Н.А. и др. Атлас эффектов нестабильности генома человека в тестах на генотоксичность. Микроскопический цитомный анализ в микроядерном тесте. М.; 2024.Ingel F.I., Yurchenko V.V., Akhal’tseva L.V., Krivtsova E.K., Konyashkina M.A., Yurtseva N.A., et al. Atlas of the Effects of Human Genome Instability in Genotoxicity Tests. Microscopic Cytome Analysis in the Micronucleus Test [Atlas effektov nestabil’nosti genoma cheloveka v testakh na genotoksichnost’. Mikroskopicheskii tsitomnyi analiz v mikroyadernom teste]. Moscow; 2024. (in Russian)Юрченко В.В., Ингель Ф.И., Малышева А.Г., Ахальцева Л.В., Кривцова Е.К., Юрцева Н.А. и др. Влияние состава загрязнения атмосферного воздуха на генотоксические эффекты в эпителиоцитах щеки детей. Гигиена и санитария. 2022; 101(2): 201–10. https://doi.org/10.47470/0016-9900-2022-101-2-201-210 https://elibrary.ru/ueqmnbYurchenko V.V., Ingel F.I., Malysheva A.G., Akhaltseva L.V., Krivtsova E.K., Yurtseva N.A., et al. Influence of the composition of atmospheric air pollution on genotoxic effects in the buccal epithelial cells in children. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal). 2022; 101(2): 201–10. https://doi.org/10.47470/0016-9900-2022-101-2-201-210 https://elibrary.ru/ueqmnb (in Russian)Кривцова Е.К., Юрченко В.В., Ингель Ф.И., Юрцева Н.А., Синицына Е.Р., Макарова А.С. Применение цитомного анализа буккального эпителия в системе гигиенической оценки условий обучения студентов разных факультетов одного вуза. Гигиена и санитария. 2018; 97(2): 179–87. https://doi.org/10.47470/0016-9900-2018-97-2-179-187 https://elibrary.ru/lbsbjjKrivtsova E.K., Yurchenko V.V., Ingel F.I., Urtseva N.A., Sinitsyna E.R., Makarova A.S. Buccal micronucleus cytome assay in the system of the hygienic evaluation of learning conditions of students of different faculties of the same university. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal). 2018; 97(2): 179–87. https://doi.org/10.47470/0016-9900-2018-97-2-179-187 https://elibrary.ru/lbsbjj (in Russian)Sladky V.C., Eichin F., Reiberger T., Villunger A. Polyploidy control in hepatic health and disease. J. Hepatol. 2021; 75(5): 1177–91. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2021.06.030Sladky V.C., Eichin F., Reiberger T., Villunger A. Polyploidy control in hepatic health and disease. J. Hepatol. 2021; 75(5): 1177–91. https://doi.org/10.1016/j.jhep.2021.06.030Gandarillas A., Molinuevo R., Sanz-Gómez N. Mammalian endoreplication emerges to reveal a potential developmental timer. Cell Death Differ. 2018; 25(3): 471–6. https://doi.org/10.1038/s41418-017-0040-0Gandarillas A., Molinuevo R., Sanz-Gómez N. Mammalian endoreplication emerges to reveal a potential developmental timer. Cell Death Differ. 2018; 25(3): 471–6. https://doi.org/10.1038/s41418-017-0040-0Fang J., de Bruin A., Villunger A., Schiffelers R., Lei Z., Sluijter J.P.G. Cellular polyploidy in organ homeostasis and regeneration. Protein Cell. 2023; 14(8): 560–78. https://doi.org/10.1093/procel/pwac064Fang J., de Bruin A., Villunger A., Schiffelers R., Lei Z., Sluijter J.P.G. Cellular polyploidy in organ homeostasis and regeneration. Protein Cell. 2023; 14(8): 560–78. https://doi.org/10.1093/procel/pwac064Colopy S.A., Bjorling D.E., Mulligan W.A., Bushman W. A population of progenitor cells in the basal and intermediate layers of the murine bladder urothelium contributes to urothelial development and regeneration. Dev. Dyn. 2014; 243(8): 988–98. https://doi.org/10.1002/dvdy.24143Colopy S.A., Bjorling D.E., Mulligan W.A., Bushman W. A population of progenitor cells in the basal and intermediate layers of the murine bladder urothelium contributes to urothelial development and regeneration. Dev. Dyn. 2014; 243(8): 988–98. https://doi.org/10.1002/dvdy.24143Глазунов О.А., Глазунова С.А., Мороз В.Е. Влияние токсиканта делагила на морфологические изменения в слизистой оболочке полости рта крыс при разном уровне поступления алиментарных полифенолов. Journal of Education, Health and Sport. 2015; 5(12): 326–32. https://doi.org/10.5281/zenodo.35466Glazunov O.A., Glazunova S.A., Moroz V.E. The influence of the toxicant delagil on the morphological changes in the oral mucosa of rats in the different levels of receipts of alimentary polyphenols. Journal of Education, Health and Sport. 2015; 5(12): 326–32. http://dx.doi.org/10.5281/zenodo.35466 (in Russian)Torres-Bugarín O., Ventura-Aguilar A., Zamora-Perez A., Gómez-Meda B.C., Ramos-Ibarra M.L., Morgan-Villela G., et al. Evaluation of cisplatin + 5-FU, carboplatin + 5-FU, and ifosfamide + epirubicine regimens using the micronuclei test and nuclear abnormalities in the buccal mucosa. Mutat. Res. 2003; 539(1–2): 177–86. https://doi.org/10.1016/s1383-5718(03)00163-3Torres-Bugarín O., Ventura-Aguilar A., Zamora-Perez A., Gómez-Meda B.C., Ramos-Ibarra M.L., Morgan-Villela G., et al. Evaluation of cisplatin + 5-FU, carboplatin + 5-FU, and ifosfamide + epirubicine regimens using the micronuclei test and nuclear abnormalities in the buccal mucosa. Mutat. Res. 2003; 539(1–2): 177–86. https://doi.org/10.1016/s1383-5718(03)00163-3Базарный В.В., Полушина Л.Г., Максимова А.Ю., Светлакова Е.Н., Семенцова Е.А. Цитологическая характеристика процессов пролиферации и апоптоза в буккальном эпителии при хроническом гингивите. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2019; 16(1): 22–6. https://doi.org/10.22138/2500-0918-2019-16-1-22-26 https://elibrary.ru/galmnoBazarnyi V.V., Polushina L.G., Maksimova A.Y., Svetlakova E.N., Sementsova E.A. Cytological characteristics of the proliferation and apoptosis processes on buccal epithelium in chronic gingivitis. Vestnik Ural’skoi meditsinskoi akademicheskoi nauki. 2019; 16(1): 22–6. https://doi.org/10.22138/2500-0918-2019-16-1-22-26 https://elibrary.ru/galmno (in Russian)Петрашова Д.А., Белишева Н.К., Пелевина И.И., Мельник Н.А., Зользер Ф. Генотоксические эффекты в буккальном эпителии горняков, работающих в условиях облучения природными источниками ионизирующего излучения. Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2011; 13(1–7): 1792–6. https://elibrary.ru/plvtfdPetrashova D., Belisheva N., Pelevina I., Melnik N., Zolder F. Genotoxical effects in buccal epithelia at miners, working in the conditions of irradiation by natural sources of ionizing radiation. Izvestiya Samarskogo nauchnogo tsentra Rossiiskoi akademii nauk. 2011; 13(1–7): 1792–6. https://elibrary.ru/plvtfd (in Russian)Илюшина Н.А., Демидова Ю.В., Макарова М.А., Илюшин А.Г., Егорова О.В., Березняк И.В. и др. Цитоморфологический анализ эксфолиативных клеток буккального эпителия у работников, имеющих контакт с пестицидами. Токсикологический Вестник. 2021; 29(4): 22–9. https://doi.org/10.36946/0869-7922-2021-29-4-22-29 https://elibrary.ru/pmosqhIlyushina N.A., Demidova Yu.V., Makarova M.A., Ilyushin A.G., Egorova O.V., Bereznyak I.V., et al. Cytogenetic analysis in exfoliated buccal epithelial cells of the workers who come into contact with pesticides. Toksikologicheskii Vestnik. 2021; 29(4): 22–9. https://doi.org/10.36946/0869-7922-2021-29-4-22-29 https://elibrary.ru/pmosqh (in Russian)Tadin A., Gavić L., Roguljić M., Babić M., Galić I., Želježić D. Assessment of cytogenetic damage to exfoliated gingival cells in patients with chronic generalized periodontitis. Acta Clin. Croat. 2021; 60(2): 209–15. https://doi.org/10.20471/acc.2021.60.02.06Tadin A., Gavić L., Roguljić M., Babić M., Galić I., Želježić D. Assessment of cytogenetic damage to exfoliated gingival cells in patients with chronic generalized periodontitis. Acta Clin. Croat. 2021; 60(2): 209–15. https://doi.org/10.20471/acc.2021.60.02.06Luke A.M., Khair Al M.B., Kudrutullah S., Mathew S., Fanas S.A., Shetty K.P., et al. Evaluation of genotoxicity in buccal mucosa of patients subjected to X-rays by degenerative nuclear alterations study. Res. J. Pharm. Technol. 2021; 14(11): 5845–8. https://doi.org/10.52711/0974-360X.2021.01017Luke A.M., Khair Al M.B., Kudrutullah S., Mathew S., Fanas S.A., Shetty K.P., et al. Evaluation of genotoxicity in buccal mucosa of patients subjected to X-rays by degenerative nuclear alterations study. Res. J. Pharm. Technol. 2021; 14(11): 5845–8. https://doi.org/10.52711/0974-360X.2021.01017Юрченко В.В., Кривцова Е.К., Подольная М.А., Ревазова Ю.А., Зыкова И.Е. Использование микроядерного теста на эпителии слизистой оболочки щеки человека. Гигиена и санитария. 2008; (6): 53–6. https://elibrary.ru/kfsidpYurchenko V.V., Krivtsova Ye.K., Podolnaya M.A., Revazova Yu.A., Zykova I.Ye. Use of micronuclcar test to the human buccal mucosal epithelium. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal). 2008; (6): 53–6. https://elibrary.ru/kfsidp (in Russian)Сидорова И.Е., Ревазова Ю.А., Сафронов В.В. Изучение генетического полиморфизма и цитогенетических нарушений у лиц, имевших контакт с токсичными химическими соединениями. Гигиена и санитария. 2004; (6): 59–62. https://elibrary.ru/mxxergSidorova I.Ye., Revazova Yu.A., Safronov V.V. Study of genetic polymorphism and cytogenetic disorders upon chemical exposures. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal). 2004; (6): 59–62. https://elibrary.ru/mxxerg (in Russian)Ревазова Ю.А., Хрипач Л.В., Сидорова И.Е., Юрченко В.В., Зыкова И.Е. Комплексный подход в оценке нестабильности генома человека. Вестник Российской академии медицинских наук. 2006; (4): 36–41. https://elibrary.ru/hsynfrRevazova Yu.A., Khripach L.V., Sidorova I.Ye., Yurchenko V.V., Zykova I.Ye. A complex approach to evaluation of human genome instability. Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk. 2006; (4): 36–41. https://elibrary.ru/hsynfr (in Russian)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.