Канд. биол. наук, зав. отд. дезинфекции и стерилизации (с лаб. микробиологии) Института дезинфектологии ФБУН «ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора, 141014, Мытищи, Россия
e-mail: eremeevani@yandex.ru
PhD (Biology), head, Department of disinfection and sterilization (with microbiology laboratory), Institute of Disinfectology of the Federal Scientific Center of Hygiene named after F.F. Erisman, Mytishchi, 141014, Russian Federation
e-mail: eremeevani@yandex.ru
Доктор мед. наук, профессор, зав. отд. микробиологических методов исследований ФБУН «ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора, 141014, Мытищи, Россия
e-mail: truhina.gm@fncg.ru
DSc (Medicine), professor, head, Department of microbiological research methods, Federal Scientific Center of Hygiene named after F.F. Erisman, Mytishchi, 141014, Russian Federation
e-mail: truhina.gm@fncg.ru
Введение. Повышение эффективности способа отбора проб с объектов внешней среды и пробоподготовки для первичного посева материала на микобактерии туберкулёза в ходе санитарно-бактериологического контроля является актуальным направлением совершенствования неспецифической профилактики туберкулёза.
Материалы и методы. Исследования (n = 2500) включали: приготовление суспензии M. tuberculosis H37Rv; подготовку и контаминацию тест-объектов (кафель, стекло, металл, пластик, лакокрасочное покрытие); подбор инструмента для отбора проб (мелкопористый поролон, ватный тампон, зонд-тампон универсальный), смывной жидкости (бульон по Ди-Ингли, 5%-й раствор Na3PO4, 0,85%-й раствор NaCl), деконтаминирующего раствора (10%-й раствор Na3PO4, NALC-NаOH); сравнительную оценку известного способа (№ 1) (приложение № 11 приказа Минздрава России № 109 от 21.03.2003 г.) и модифицированного способа (№ 2).
Результаты. Эффективность способа № 2 за счёт использования зонд-тампона универсального, бульона по Ди-Ингли, NALC-NaOH значимо (p-value < 0,001) превышает эффективность способа № 1 (мелкопористый поролон, 5%-й и 10%-й растворы Na3PO4) в 48 раз при концентрации Mtb в смывной жидкости 103 КОЕ/мл, в 22,3 раза – при концентрации 104 КОЕ/мл, в 8 раз – при 105 КОЕ/мл и в 4,6 раза – при 106 КОЕ/мл.
Ограничения исследования. Разработанный способ позволяет получить рост КОЕ Mtb на среде Левенштейна – Йенсена при концентрации Mtb в смывной жидкости от 103 КОЕ/мл.
Заключение. Показана высокая эффективность разработанного способа выделения Mtb с объектов внешней среды, превышающего в 48 раз по уровню высеваемости Mtb результаты, полученные стандартным способом в ходе санитарно-бактериологического контроля. Одновременно снижены трудозатраты, сокращено время на выполнение исследований. Стандартизирована методика в части исключения ручной подготовки инструмента, применения бульона по Ди-Ингли, положительно влияющего на жизнеспособность Mtb; сокращения времени деконтаминации с 18–24 ч до 40–45 мин. Полученные результаты позволяют рассматривать представленный способ как перспективный для включения в перечень методов санитарно-бактериологического контроля M. tuberculosis.
Соблюдение этических стандартов. Исследование не требует представления заключения комитета по биомедицинской этике или иных документов.
Участие авторов: Еремеева Н.И. – концепция и дизайн исследования, сбор материала и обработка данных, написание текста, редактирование, утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех её частей; Трухина Г.М. – концепция и дизайн исследования, редактирование, утверждение окончательного варианта статьи.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов в связи с публикацией данной статьи.
Финансирование. Исследование выполнено в рамках научно-исследовательских работ: № НИОКТР 121022600261–1 «Биологические свойства клинических изолятов Mycobacterium tuberculosis, устойчивых к действию антибактериальных и биоцидных препаратов»; № НИОКТР 1023032900360–9–1.6.2 «Разработка новых методологий оценки эффективности применения физических, химических и комбинированных методов дезинфекции и стерилизации».
Поступила: 20.04.2025 / Поступила после доработки: 06.07.2025 / Принята к печати: 19.09.2025 / Опубликована: 20.10.2025
Introduction. Improving the efficiency of the method of washouts from environmental objects and sample preparation for the primary seeding of material for Mycobacterium tuberculosis (Mtb) during sanitary and bacteriological control is an urgent area of improvement of nonspecific tuberculosis prevention.
Materials and Methods. The studies (n=2500) included: suspension preparation Mtb H37Rv); preparation and contamination of test-objects (tile, glass, metal, plastic, painted surface); selection of tools for washouts (fine-pore foam, cotton swab, universal tampon probe), solution for washout (Dey-Engley broth, 5.0% Na3PO4, 0.9% NaCl), solution for decontamination (10.0% Na3PO4, NALC-NaOH); comparative of the efficacy of two methods for the isolation of Mtb (known method No.1 and modified method No.2).
Results. The efficiency of the method No. 2 (due to the use of: universal tampon probe; Dey-Engley broth; NALC-NaOH) significantly (p-value <0.001) exceeds the efficiency of method No. 1 (fine-pore foam, 5.0% and 10.0% Na3PO4 solutions) by 48.0 times at the concentration of Mtb in the solution of washout at 103 CFU/ml, by 22.3 times – at the concentration of 104 CFU/ml, by 8.0 times – at 105 CFU/ml and by 4.6 times – at 106 CFU/ml.
Limitation. The modified method allows obtaining growth of CFU of Mtb on Levenshtein-Jensen at the concentration of Mtb in the solution of washout at 103 CFU/ml.
Conclusions. High efficiency of the developed method of Mtb isolation from the objects of external environment (exceeding by 48 times the results obtained by the standard method) during sanitary and bacteriological control, reduction both of labor costs and the of time for research, standardization of the method in terms of exclusion of tools prepared by “manual” method; use of Dey-Engley broth, positively affecting the viability of Mtb; reduction of decontamination time from 18–24 hours to 40–45 min – allow considering the presented method as a promising one for inclusion in the list of methods of sanitary and bacteriological control in relation to Mtb.
Compliance with ethical standards. The study did not require ethical committee approval (no studies using animals or involving humans).
Contribution: Eremeeva N.I. – concept and design of the study, collection of material and data processing, writing, editing, approval of the final version of the article, responsibility for the integrity of all parts of the article; Trukhina G.M. – research concept and design, text writing, editing, and approval of the final version of the article. All authors are responsible for the integrity of all parts of the manuscript and approval of the manuscript final version.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. The study was carried out within the framework of research works: No. NIOCTR 121022600261-1 “Biological properties of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis resistant to antibacterial and biocidal drugs”; No. NIOCTR 1023032900360-9-1.6.2 “Development of new methodologies for assessing the effectiveness of physical, chemical and combined methods of disinfection and sterilization”.
Received: April 20, 2025 / Revised: July 6, 2025 / Accepted: September 19, 2025 / Published: October 20, 2025
The authors declare that there are no conflicts of interest present.