medlitГигиена и санитарияHygiene and Sanitation0016-99002412-0650Federal Scientific Center of Hygiene named after F.F. Erisman10.47470/0016-9900-2018-97-9-785-790medlit-629Research ArticleГИГИЕНА ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫENVIRONMENTAL HYGIENEСравнительный анализ содержания антител к H. pylori и рекомбинантному антигену CAGA в сыворотках выборки трудоспособного населения МосквыComparative analysis of serum antibody responses to H.Pylori and to recombinant CAGA in the cohort of working-age moscow adultshttps://orcid.org/0000-0003-0170-3085ХрипачЛюдмила ВасильевнаKhripachLudmila V.

Доктор биол. наук, зав. лабораторией биохимических и молекулярно-генетических методов исследования ФГБУ «ЦСП» Минздрава России.

e-mail: lkhripach@mail.ru

Dr. Sci. Biol., head of the laboratory of biochemical and molecular genetics methods, Centre for Strategic Planning, Russian Ministry of Health.

e-mail: lkhripach@mail.ru

lkhripach@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5279-5018КнязеваТ. Д.KnjazevaT. D.noemail@neicon.ruЮдинС. М.YudinS. M.noemail@neicon.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1628-199XГерманС. В.GermanS. V.noemail@neicon.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6711-9124ЗыковаИ. Е.ZykovaI. E.noemail@neicon.ruФГБУ «ЦСП» Минздрава РоссииCentre for Strategic Planning, Russian Ministry of Health201820102020979785790Copyright © Хрипач Л.В., Князева Т.Д., Юдин С.М., Герман С.В., Зыкова И.Е., 20202020Хрипач Л.В., Князева Т.Д., Юдин С.М., Герман С.В., Зыкова И.Е.Khripach L.V., Knjazeva T.D., Yudin S.M., German S.V., Zykova I.E.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.rjhas.ru/jour/article/view/629Введение

Введение. Helicobacter pylori (Hр) — спиралевидная бактерия, эволюционно приспособленная к существованию в надэпителиальной желудочной слизи. Рассматривается в настоящее время как один из факторов развития гастрита, язвенной болезни и злокачественных новообразований желудка, хотя неоднократно высказывались и противоположные мнения. Целью данного исследования является оценка содержания сывороточных антител к Нр и рекомбинантному антигену CagA в выборке трудоспособных жителей Москвы. 

Материал и методы

Материал и методы. Обследованная выборка жителей Москвы включала 319 чел. обоего пола трудоспособного возраста. Для измерения содержания сывороточных антител к Нр и CagA использовались тест-наборы ИФА-Хеликобактер IgG (ЗАО «ЭКОлаб») и «ХеликоБест — антитела» (ЗАО «Вектор-Бест») соответственно. 

Результаты

Результаты. Показано, что положительную реакцию на наличие IgG-антител к H. pylori имело 85% обследованных лиц с близким к логнормальному распределением титров антител (медиана 1:688; Q1–Q3 1:370–1:1223) при значении уровня среза 1:100. По уровню суммарных антител (IgM, IgA и IgG) к антигену CagA серопозитивными являлись 54% обследованных лиц с содержанием антител в условных единицах ИФА (EU, elisa units) от 23 до 129 (медиана 87,9; Q1–Q3 56,7–102,5) при значении уровня среза 18,5; распределение этой величины резко отличалось от логнормального распределения содержания IgG-антител к комплексу антигенов Hр и имело признаки бимодальности со сдвинутым вправо основным максимумом. В полной выборке обследованных лиц (N = 319) содержание сывороточных антител к Нр и CagA было связано слабой (R = 0,217), но высокодостоверной (p = 0,00009) положительной связью; в зоне выше уровней среза обеих переменных достоверная связь между ними отсутствовала. 

Обсуждение

Обсуждение. Обсуждены возможные причины различий в характере распределения изучавшихся показателей. Логнормальное распределение содержания антител к комплексному антигену Нр с учётом экстраординарной генетической вариабельности природных изолятов может отражать комбинаторные различия в степени близости антигенных детерминат Нр у конкретного человека с представленными в антигенном препарате. Возможно, бимодальное распределение содержания антител к индивидуальному антигену CagA отражает генетически детерминированные различия по иммунореактивности внутри обследуемой популяции людей.

Introduction

Introduction. Helicobacter pylori (Hр) is a helix-shaped bacterium adapted evolutionary to living in the mucoid of stomach. Considered usually as one of the factors in the development of gastritis, peptic ulcer and gastric cancer, but the opposite opinions were also discussed. The aim of this study was to assess levels of serum antibodies to Hp and recombinant CagA in the cohort of working-age Moscow adults. 

Methods

Methods. Commercial ELISA kits “IFA-Helicobacter IgG”© (ZAO EKOlab, Russia) and “HelicoBest-antibodies”© (ZAO Vector-Best, Russia) were applied for the estimation of serum antibodies to Hp and CagA, correspondingly, in the observed cohort (both gender adults, N=319). 

Results

Results. 85 % of the human cohort (N=271) had positive rates of IgG-antibodies against complex Hp antigen, with lognormal distribution of IgG titers (median 1:688; Q1 — Q3 1:370 - 1:1223) and cut-off value equal to 1:100. 54 % of the human cohort (N=172) were seropositive to recombinant CagA, with the levels of total serum antibodies (IgM, IgA and IgG) from 23 to 129 elisa units (median 87,9; Q1 — Q3 56,7 — 102,5) and cut-off value equal to 18,5 EU. The distribution of CagA antibody levels was sharply different from lognormal distribution of IgG titers to complex Hp antigen and had signs of bimodality with the main maximum shifted to the right. In the complete cohort under observation (N=319), the levels of serum antibodies to Hp and CagA were associated with a weak (R=0,217), but highly significant (p=0,00009) positive linkage; human persons, seropositive to both antigens, had no any association between the markers. 

Discussion

Discussion. Possible reasons of differences in the shape of distributions of the studied markers are discussed. Taking into account the extraordinary genetic variability of natural Hp isolates, lognormal distribution of antibodies to complex Hp antigen can reflect combinatorial differences in the degree of proximity of Hp antigenic determinants between human persons under observation and the antigenic preparation. Bimodal distribution of antibody levels to individual protein CagA, possibly, reflect genetically determined differences in immunoreactivity inside the observed cohort.

трудоспособное населениесыворотка кровииммуноферментный анализуровень антителHelicobacter pyloriрекомбинантный антиген CagAhuman cohortMoscow adultsblood serumELISAantibodiesHelicobacter pylorirecombinant CagAReferencesBlaser M.J. Ecology of Helicobacter pylori in the human stomach. J. Clin. Invest. 1997; 100(4): 759-762.Blaser M.J. Ecology of Helicobacter pylori in the human stomach. J. Clin. Invest. 1997; 100(4): 759–762.Fuccio L., Eusebi L.H., Bazzoli F. Gastric cancer, Helicobacter pylori infection and other risk factors. World J. Gastrointest. Oncol. 2010; 2(9): 342-347.Fuccio L., Eusebi L.H., Bazzoli F. Gastric cancer, Helicobacter pylori infection and other risk factors. World J. Gastrointest. Oncol. 2010; 2(9): 342–347.Malfertheiner P., Megraud F., O’Morain C.A., Gisbert J.P., Kuipers E.J., Axon A.T. et al. Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017; 66: 6-30.Malfertheiner P., Megraud F., O’Morain C.A., Gisbert J.P., Kuipers E.J., Axon A.T. et al. Management of Helicobacter pylori infection—the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017; 66: 6-30.Labenz J., Blum A.L., Bayerdörffer E., Meining A., Stolte M., Börsch G. Curing Helicobacter pylori infection in patients with duodenal ulcer may provoke reflux esophagitis. Gastroenterology. 1997; 112(5): 1442-1447.Labenz J., Blum A.L., Bayerdörffer E., Meining A., Stolte M., Börsch G. Curing Helicobacter pylori infection in patients with duodenal ulcer may provoke reflux esophagitis. Gastroenterology. 1997; 112(5):1442-1447.Чернин В.В., Бондаренко В.М., Червинец В.М., Базлов С.Н. Helicobacter pylori как составная часть микробиоценоза мукозной микрофлоры эзофагогастродуоденальной зоны в норме и патологии. Эксп. клин. гастроэнтерол. 2011; № 8: 66-72.Chernin V.V., Bondarenko V.M., Chervinets V.M., Bazlov S.N. Helicobacter pylori as an integral part of the microbiocenosis of the mucosal microflora of the esophagogastroduodenal zone in norm and pathology. Exp. wedge. gastroenterol. 2011; No. 8: 66-72.Циммерман Я.С. Действительно ли открытие Helicobacter pylori стало революцией в гастроэнтерологии. Клин. мед. 2013; № 8 :13-21.Zimmerman Ya.S. Is the discovery of Helicobacter pylori really a revolution in gastroenterology? Klin. med. 2013; No. 8 : 13-21.Eusebi L.H., Zagari R.M., Bazzoli F. Epidemiology of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 2014; Suppl 1:1-5. https://doi.org/10.1111/hel.12165Eusebi L.H., Zagari R.M., Bazzoli F. Epidemiology of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 2014; Suppl 1:1-5. https://doi.org/10.1111/hel.12165Li S., Lu A.-P., Zhang L., Li Y.-D. Anti-Helicobacter pylori immunoglobulin G (IgG) and IgA antibody responses and the value of clinical presentations in diagnosis of Helicobacter pylori infection in patients with precancerous lesions. World J. Gastroenterol. 2003; 9(4): 755-758.Li S., Lu A.-P., Zhang L., Li Y.-D. Anti-Helicobacter pylori immunoglobulin G (IgG) and IgA antibody responses and the value of clinical presentations in diagnosis of Helicobacter pylori infection in patients with precancerous lesions. World J. Gastroenterol. 2003; 9(4):755-758.Хомерики С.Г., Касьяненко В.И. Лабораторная диагностика инфекции Helicobacter pylori - С. Петербург: ООО «АМА», 2011. - 110 С.Homeriki S.G., Kasyanenko V.I. Laboratory diagnostics of Helicobacter pylori infection - St. Petersburg: LLC "AMA", 2011. - 110 P.Климович А.В. Создание иммунохимических реагентов для выявления CagA-антигена Helicobacter pylori и антител против него. Автореферат канд. диссертации. Санкт-Петербург, 2010. - 20 С.Klimovich A.V. Creation of immunochemical reagents for the detection of Helicobacter pylori CagA antigen and antibodies against it. Abstract of the candidate. dissertations. Saint Petersburg, 2010. - 20 P.Вартанова Н.О., Арзуманян Н.О., Поддубиков А.В., Ванеева Н.П., Сердюк О.А. Совершенствование иммунодиагностики хеликобактериоза. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2007; № 4: 34-37.Vartanova N.O., Arzumanyan N.O., Poddubikov A.V., Vaneeva N.P., Serdyuk O.A. Improving the immunodiagnostics of helicobacteriosis. Epidemiology and vaccination prevention. 2007; № 4: 34-37.Hoang T.T., Wheeldon T.U., Bengtsson G., Phung D.C., Sorberg M., Granstrom M. Enzyme-linked immunosorbent assay for Helicobacter pylori needs adjustment for the population investigated. J. Clin. Microbiol. 2004; 42(2): 627-630.Hoang T.T., Wheeldon T.U., Bengtsson G., Phung D.C., Sorberg M., Granstrom M. Enzyme-linked immunosorbent assay for Helicobacter pylori needs adjustment for the population investigated. J. Clin. Microbiol. 2004; 42(2): 627–630.Yan J., Mao Y.-F., Shao Z.-X. Frequencies of the expression of main protein antigens from Helicobacter pylori isolates and production of specific serum antibodies in infected patients. World J. Gastroenterol. 2005;11(3):421-425Yan J., Mao Y.-F., Shao Z.-X. Frequencies of the expression of main protein antigens from Helicobacter pylori isolates and production of specific serum antibodies in infected patients. World J. Gastroenterol. 2005;11(3):421-425Akada J., Okuda M., Hiramoto N., Kitagawa T., Zhang X., Kamei S. et al. Proteomic characterization of Helicobacter pylori CagA antigen recognized by child serum antibodies and its epitope mapping by peptide array. PLoS ONE. 2014; 9(8): e104611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104611Akada J., Okuda M., Hiramoto N., Kitagawa T., Zhang X., Kamei S. et al. Proteomic characterization of Helicobacter pylori CagA antigen recognized by child serum antibodies and its epitope mapping by peptide array. PLoS ONE. 2014; 9(8): e104611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104611Censini S., Lange C., Xiang Z., Crabtree J.E., Ghiara P., Borodovsky M. et al. Cag, a pathogenicity island of Helicobacter pylori, encodes type I-specific and disease-associated virulence factors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996; 93(25): 14648-14653.Censini S., Lange C., Xiang Z., Crabtree J.E., Ghiara P., Borodovsky M. et al. Cag, a pathogenicity island of Helicobacter pylori, encodes type I-specific and disease-associated virulence factors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996; 93(25):14648-14653.Naito M., Yamazaki T., Tsutsumi R., Higashi H., Onoe K., Yamazaki S. et al. Influence of EPIYA-repeat polymorphism on the phosphorylation-dependent biological activity of Helicobacter pylori CagA. Gastroenterology. 2006; 130(4): 1181-1190.Naito M., Yamazaki T., Tsutsumi R., Higashi H., Onoe K., Yamazaki S. et al. Influence of EPIYA-repeat polymorphism on the phosphorylation-dependent biological activity of Helicobacter pylori CagA. Gastroenterology. 2006; 130(4): 1181-1190.Jones K.R., Joo Y.M., Jang S., Yoo Y.J., Lee H.S., Chung I.S. et al. Polymorphism in the CagA EPIYA motif impacts development of gastric cancer. J. Clin. Microbiol. 2009; 47(4): 959-968.Jones K.R., Joo Y.M., Jang S., Yoo Y.J., Lee H.S., Chung I.S. et al. Polymorphism in the CagA EPIYA motif impacts development of gastric cancer. J. Clin. Microbiol. 2009; 47(4): 959-968.Keates S., Sougioultzis S., Keates A.C., Zhao D., Peek R.M., Shaw L.M. et al. Cag+ Helicobacter pylori induce transactivation of the epidermal growth factor receptor in AGS gastric epithelial cells. J. Biol. Chem. 2001; 276(51): 48127-48134.Keates S., Sougioultzis S., Keates A.C., Zhao D., Peek R.M., Shaw L.M. et al. Cag+ Helicobacter pylori induce transactivation of the epidermal growth factor receptor in AGS gastric epithelial cells. J. Biol. Chem. 2001; 276(51): 48127-48134.Cardoso L., Lopes A.P., Sherry K., Schallig H., Solano-Gallego L. Low seroprevalence of Leishmania infantum infection in cats from northern Portugal based on DAT and ELISA. Vet. Parasitol. 2010; 174(1-2): 37-42.Cardoso L., Lopes A.P., Sherry K., Schallig H., Solano-Gallego L. Low seroprevalence of Leishmania infantum infection in cats from northern Portugal based on DAT and ELISA. Vet. Parasitol. 2010; 174(1-2): 37-42.Решетников О.В., Курилович С.А., Кротов С.А., Кротова В.А. Хеликобактерная инфекция в сибирских популяциях. Бюлл. СО РАМН. 2010; 30(2): 88-93.Reshetnikov O.V., Kurilovich S.A., Krotov S.A., Krotova V.A. Helicobacter infection in Siberian populations. Byull. WITH RAMS. 2010; 30(2): 88-93.Герман С.В., Зыкова И.Е., Модестова А.В., Ермаков Н.В. Распространенность инфекции H. pylori среди населения Москвы. Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 2010; № 2: 25-30.Herman S.V., Zykova I.E., Modestova A.V., Ermakov N.V. Prevalence of H. pylori infection among the population of Moscow. Ross. journal. gastroenterol., hepatol., coloproctol. 2010; No. 2: 25-30.Рахманин Ю.А., Зыкова И.Е., Федичкина Т.П., Соленова Л.Г., Герман С.В., Модестова А.В. и др. Изучение территориального распределения инфицированности Helicobacter pylori трудоспособного населения г. Москвы в ходе диспансеризации производственных контингентов. Гигиена и санитария. 2013; №5: 79-82.Rakhmanin Yu.A., Zykova I.E., Fedichkina T.P., Solenova L.G., Herman S.V., Modestova A.V., etc. The study of the territorial distribution of Helicobacter pylori infection in the able-bodied population of Moscow during the medical examination of production contingents. Hygiene and sanitation. 2013; №5: 79-82.Макаренко Е.В. Пиманов С.И., Воропаева А.В., Бондаренко В.М. Распространенность инфекции Helicobacter pylori в Витебском регионе. Вестник Витебского ГМУ. 2005; 4(4): 12-19.Makarenko E.V. Pimanov S.I., Voropaeva A.V., Bondarenko V.M. The prevalence of Helicobacter pylori infection in the Vitebsk region. Bulletin of the Vitebsk State Medical University. 2005; 4(4): 12-19.Vorobjova T., Nilsson I., Kull K., Maaroos H.I., Covacci A., Wadstrom T. et al. CagA protein seropositivity in a random sample of adult population and gastric cancer patients in Estonia. Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 1998; 10: 41-46.Vorobjova T., Nilsson I., Kull K., Maaroos H.I., Covacci A., Wadstrom T. et al. CagA protein seropositivity in a random sample of adult population and gastric cancer patients in Estonia. Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 1998; 10: 41–46.Fusconi M., Vaira D., Menegatti M., Farinelli S., Figura N., Holton J. et al. Anti-CagA reactivity in Helicobacter pylori-negative subjects. Digestive Diseases and Sciences. 1999; 44(8): 1691-1695.Fusconi M., Vaira D., Menegatti M., Farinelli S., Figura N., Holton J. et al. Anti-CagA reactivity in Helicobacter pylori-negative subjects. Digestive Diseases and Sciences. 1999; 44(8): 1691-1695.Han Y.H., Liu W.Z., Shi Y.Z., Lu L.Q., Xiao S., Zhang Q.H. et al. Comparative genomics profiling of clinical isolates of Helicobacter pylori in Chinese populations using DNA microarray. J Microbiol. 2007; 45(1): 21-28.Han Y.H., Liu W.Z., Shi Y.Z., Lu L.Q., Xiao S., Zhang Q.H. et al. Comparative genomics profiling of clinical isolates of Helicobacter pylori in Chinese populations using DNA microarray. J Microbiol. 2007; 45(1): 21-28.Момыналиев К.Т. Геномно-протеомная характеристика вариабельности Helicobacter pylori. Автореферат докт. диссертации. Москва, 2009. - 45 С.Momynaliev K.T. Genomic-proteomic characteristics of Helicobacter pylori variability. Abstract of the doct. dissertations. Moscow, 2009– - 45 P.Березняк Е.А., Сорокин В.М., Карпова И.О., Ступина Н.А., Терентьев А.Н. Особенности 23генотипов штаммов Helicobacter pylori, циркулирующих в Ростовской области. Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2013; № 4: 30-33.Bereznyak E.A., Sorokin V.M., Karpova I.O., Stupina N.A., Terentyev A.N. Features of 23 genotypes of Helicobacter pylori strains circulating in the Rostov region. Epidemiology and Vaccination Prevention. 2013; № 4: 30-33.Siman F.H., Engstrand L., Berglund G., Floren C.H., Forsgren A. Evaluation of western blot CagA seropositivity in Helicobacter pylori-seroposit -seronegative subjects. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2005; 12(2): 304-309.Siman F.H., Engstrand L., Berglund G., Floren C.H., Forsgren A. Evaluation of western blot CagA seropositivity in Helicobacter pylori-seroposit -seronegative subjects. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2005; 12(2): 304-309.Matsuo Y. Kido Y., Akada J., Shiota S., Binh T.T., Trang T. et al. Novel CagA ELISA exhibits enhanced sensitivity of Helicobacter pylori CagA antibody. World J. Gastroenterol. 2017; 23(1): 48-59.Matsuo Y. Kido Y., Akada J., Shiota S., Binh T.T., Trang T. et al. Novel CagA ELISA exhibits enhanced sensitivity of Helicobacter pylori CagA antibody. World J. Gastroenterol. 2017; 23(1): 48-59.Хрипач Л.В., Гришин Д.А., Кириллов А.В., Козлова О.Б., Солнцева Н.В., Круглова Е.В. и др. Фенотипический полиморфизм медико-биологических показателей состояния здоровья в гигиенических исследованиях. Гигиена и санитария. 2011; №5: 32-36Хрипач Л.В., Гришин Д.А., Кириллов А.В., Козлова О.Б., Солнцева Н.В., Круглова Е.В. и др. Фенотипический полиморфизм медико-биологических показателей состояния здоровья в гигиенических исследованиях. Гигиена и санитария. 2011; №5: 32-36

The authors declare that there are no conflicts of interest present.