Эффективность методов контроля объектов внешней среды медицинских организаций в отношении возбудителя туберкулёза. Часть 1. Способы отбора и пробоподготовки

Введение. Повышение эффективности способа отбора проб с объектов внешней среды и пробоподготовки для первичного посева материала на микобактерии туберкулёза в ходе санитарно-бактериологического контроля является актуальным направлением совершенствования неспецифической профилактики туберкулёза.

Материалы и методы. Исследования (n = 2500) включали: приготовление суспензии M. tuberculosis H₃₇Rv; подготовку и контаминацию тест-объектов (кафель, стекло, металл, пластик, лакокрасочное покрытие); подбор инструмента для отбора проб (мелкопористый поролон, ватный тампон, зонд-тампон универсальный), смывной жидкости (бульон по Ди-Ингли, 5%-й раствор Na₃PO₄, 0,85%-й раствор NaCl), деконтаминирующего раствора (10%-й раствор Na₃PO₄, NALC-NаOH); сравнительную оценку известного способа (№ 1) (приложение № 11 приказа Минздрава России № 109 от 21.03.2003 г.) и модифицированного способа (№ 2).

Результаты. Эффективность способа № 2 за счёт использования зонд-тампона универсального, бульона по Ди-Ингли, NALC-NaOH значимо (p-value < 0,001) превышает эффективность способа № 1 (мелкопористый поролон, 5%-й и 10%-й растворы Na₃PO₄) в 48 раз при концентрации Mtb в смывной жидкости 10³ КОЕ/мл, в 22,3 раза – при концентрации 10⁴ КОЕ/мл, в 8 раз – при 10⁵ КОЕ/мл и в 4,6 раза – при 10⁶ КОЕ/мл.

Ограничения исследования. Разработанный способ позволяет получить рост КОЕ Mtb на среде Левенштейна – Йенсена при концентрации Mtb в смывной жидкости от 10³ КОЕ/мл.

Заключение. Показана высокая эффективность разработанного способа выделения Mtb с объектов внешней среды, превышающего в 48 раз по уровню высеваемости Mtb результаты, полученные стандартным способом в ходе санитарно-бактериологического контроля. Одновременно снижены трудозатраты, сокращено время на выполнение исследований. Стандартизирована методика в части исключения ручной подготовки инструмента, применения бульона по Ди-Ингли, положительно влияющего на жизнеспособность Mtb; сокращения времени деконтаминации с 18–24 ч до 40–45 мин. Полученные результаты позволяют рассматривать представленный способ как перспективный для включения в перечень методов санитарно-бактериологического контроля M. tuberculosis.

Соблюдение этических стандартов. Исследование не требует представления заключения комитета по биомедицинской этике или иных документов.

Участие авторов:
Еремеева Н.И. – концепция и дизайн исследования, сбор материала и обработка данных, написание текста, редактирование, утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех её частей;
Трухина Г.М. – концепция и дизайн исследования, редактирование, утверждение окончательного варианта статьи.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов в связи с публикацией данной статьи.

Финансирование. Исследование выполнено в рамках научно-исследовательских работ: № НИОКТР 121022600261–1 «Биологические свойства клинических изолятов Mycobacterium tuberculosis, устойчивых к действию антибактериальных и биоцидных препаратов»; № НИОКТР 1023032900360–9–1.6.2 «Разработка новых методологий оценки эффективности применения физических, химических и комбинированных методов дезинфекции и стерилизации».

Поступила: 20.04.2025 / Поступила после доработки: 06.07.2025 / Принята к печати: 19.09.2025 / Опубликована: 20.10.2025

1. Васильева И.А., Стерликов С.А., Тестов В.В., Михайлова Ю.В., Голубев Н.А., Кучерявая Д.А. и др. Ресурсы и деятельность противотуберкулёзных организаций Российской Федерации в 2022–2023 гг. М.; 2024.

2. WHO. Global tuberculosis report; 2024. Доступно: https://who.int/teams/global-tuberculosis-programme/tb-reports/global-tuberculosis-report-2024

3. Государственный доклад «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2023 году». М.; 2024.

4. Захарова Ю.А. Лабораторная диагностика инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Екатеринбург: ИД ЮНИКА; 2021. https://elibrary.ru/wlsskp

5. Акимкин В.Г., Захарова Ю.А., Игонина Е.П., Болгарова Е.В. Нозокомиальные респираторные вирусные инфекуции: современное состояние проблемы. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019; 96(5): 50–61. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-5-50-61 https://elibrary.ru/akeima

6. Акимкин В.Г., Алимов А.В., Захарова Ю.А., Болгарова Е.В., Питерский М.В., Сисин Е.И. Обзор актуальных вопросов диагностики и профилактики гемоконтактных нозокомиальных вирусных инфекций. Вопросы вирусологии. 2019; 64(6): 262–7. https://doi.org/10.36233/0507-4088-2019-64-6-262-267 https://elibrary.ru/gglwtm

7. Захарова Ю.А., Фельдблюм И.В. Сравнительная характеристика микрофлоры, выделенной из очагов гнойно-септических инфекций с множественными и единичными случаями. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2009; (5): 16–21. https://elibrary.ru/kywcvf

8. Орлова О.А., Юмцунова Н.А., Семененко Т.А., Карпов О.Э., Русакова Е.В., Зотова А.А. и др. Новые технологии в комплексе мероприятий по неспецифической профилактике инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Гигиена и санитария. 2020; 99(10): 1055–60. https://doi.org/10.47470/0016-9900-2020-99-10-1055-1060 https://elibrary.ru/djncpc

9. Голубкова А.А., Кутлаева Ю.Ю., Багин В.А. Специфическая и неспецифическая профилактика гнойно-септических инфекций и их место в мультимодальной системе контроля ИСМП в ОРИТ ожогового центра. Медицинский алфавит. 2020; (18): 33–7. https://doi.org/10.33667/2078-5631-2020-18-33-37 https://elibrary.ru/gruqea

10. Еремеева Н.И., Кравченко М.А., Вахрушева Д.В., Канищев В.В., Бобровская К.В., Умпелева Т.В. Оценка контаминации внешней среды противотуберкулезного стационара как компонент системы инфекционного контроля. Медицинский альянс. 2013; (4): 41–52. https://elibrary.ru/snidvl

11. Мясникова Е.Б., Сагиева Н.Р., Журавлев В.Ю., Яблонский П.К. Нозокомиальная туберкулезная инфекция – обоснование концепции эпидемиологической диагностики. Медицинский альянс. 2014; (1): 6–18. https://elibrary.ru/tonetp

12. Maes S., Huu S.N., Heyndrickx M., Weyenberg S.V., Steenackers H., Verplaetse A., et al. Evaluation of two surface sampling methods for microbiological and chemical analyses to assess the presence of biofilms in food companies. J. Food Prot. 2017; 80(12): 2022–8. https://doi.org/10.4315/0362-028X.JFP-17-210

13. Ahnrud G.P., Mendoza A.J., Hurley M.J., Marek P.J. Efficacy of a sonicating swab for removal and capture of microorganisms from experimental and natural contaminated surfaces. Appl. Environ. Microbiol. 2018; 84(9): e00208–18. https://doi.org/10.1128/AEM.00208-18

14. Moore G., Griffith C. Problems associated with traditional hygiene swabbing: the need for in-house standardization. J. Appl. Microbiol. 2007; 103(4): 1090–103. https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.2007.03330.x

15. Zhang Y., Gao Z., He L. Integration of surface swab with optical microscopy for detection and quantification of bacterial cells from stainless-steel surfaces. Lett. Appl. Microbiol. 2024; 77(10): ovae089. https://doi.org/10.1093/lambio/ovae089

16. Goverde M., Willrodt J., Staerk A. Evaluation of the recovery rate of different swabs for microbial environmental monitoring. PDA J. Pharm. Sci. Technol. 2017; 71(1): 33–42. https://doi.org/10.5731/pdajpst.2016.006783

17. Смирнова С.С., Жуйков Н.Н., Егоров И.А., Пушкарева Н.А., Семенов А.В. Сравнительный анализ методов отбора проб смывов с объектов внешней среды для оценки вирусно-бактериальной контаминации. Здоровье населения и среда обитания – ЗНИСО. 2023; 31(4): 77–84. https://doi.org/10.35627/2219-5238/2023-31-4-77-84 https://elibrary.ru/yovvay

18. Голышевская В.И., Шульгина М.В., Севастьянова Э.В., Акимкин В.Г., Ванина Г.М., Вахрушева Д.В. и др. Культуральные методы диагностики туберкулеза. Тверь: Триада; 2008. https://elibrary.ru/tametf

19. Севастьянова Э.В., Ларионова Е.Е., Андриевская И.Ю., Смирнова Т.Г. Культуральный метод исследования микобактерий. Деконтаминация образцов диагностического материала. Вестник Центрального научно-исследовательского института туберкулеза. 2020; (2): 89–99. https://doi.org/10.7868/S2587667820020119 https://elibrary.ru/bcjpnu

20. Севастьянова Э.В., Смирнова Т.Г., Ларионова Е.Е., Черноусова Л.Н. Культуральный метод исследования микобактерий. Жидкие питательные среды и автоматизированные системы. Вестник Центрального научно-исследовательского института туберкулеза. 2020; (4): 88–95. https://doi.org/10.7868/S258766782004010X https://elibrary.ru/pitywd

21. Федорова Л.С., Юзбашев В.Г., Попов С.А., Пузанов В.А., Севостьянова Э.В., Акимкин В.Г. и др. Система инфекционного контроля в противотуберкулезных учреждениях. Тверь: Триада; 2013. https://elibrary.ru/tamerr

22. Dey B.P., Engley F.B. Jr. Comparison of Dey and Engley (D/E) neutralizing medium to Letheen medium and standard methods medium for recovery of Staphylococcus aureus from sanitized surfaces. J. Ind. Microbiol. 1995; 14(1): 21–5. https://doi.org/10.1007/BF01570061

23. Li F., Xian Z., Kwon H.J., Yoo J., Burall L., Chirtel S.J., et al. Comparison of three neutralizing broths for environmental sampling of low levels of Listeria monocytogenes desiccated on stainless steel surfaces and exposed to quaternary ammonium compounds. BMC Microbiol. 2020; 20(1): 333. https://doi.org/10.1186/s12866-020-02004-1

24. Mohammad Z.H., Hasan A.A., Kerth C.R., Riley D.G., Taylor T.M. Increased effectiveness of microbiological verification by concentration-dependent neutralization of sanitizers used in poultry slaughter and fabrication allowing Salmonella enterica survival. Foods. 2018; 7(3): 32. https://doi.org/10.3390/foods7030032

25. Infante V.V., Cano A.M., Medina Valdovinos H., Macías A.E., Alvarez J.A. Saline solution as culture media from a viewpoint of nosocomial bacteremia. Rev. Invest. Clin. 2012; 64(2): 120–5. (in Spanish)

26. Лямин А.В., Исматуллин Д.Д., Жестков А.В., Ковалёв А.М., Персиянцева Т.П., Давыдова Д.Т. и др. Контаминирующая микрофлора при обследовании на туберкулез: сапрофиты или потенциальные патогены? Иммунология, аллергология, инфектология. 2019; (3): 63–70. https://doi.org/10.14427/jipai.2019.3.63 https://elibrary.ru/elzpvw

27. Лямин А.В. Контаминирующая микрофлора при обследовании на туберкулез: зависимость от питательных сред для первичного посева. Астраханский медицинский журнал. 2019; 14(4): 29–36. https://elibrary.ru/lujybm

28. Linguissi L.S.G., Fotso B.T., Andoseh G., Assiana D.E., Ntoumi F. Decontamination of sputum in the context of implementation of mycobacterial culture in the Republic of Congo. J. Bacteriol. Mycol. 2020; 7(6): 1146.21.

29. Le Quang N., Dang Anh Thu D., Pham Tien Trieu L., Hong Hanh N., Huu Lan N., Thi Minh Ha D., et al. A modified decontamination and storage method for sputum from patients with tuberculosis. Wellcome Open Res. 2025; 8: 166. https://doi.org/10.12688/wellcomeopenres.18888.3