Методическое обеспечение контроля содержания стойкого органического загрязнителя гексахлорбензола в крови

Введение. Опасную группу соединений, оказывающих негативное влияние на здоровье населения и загрязняющих окружающую среду, представляют стойкие органические загрязнители (СОЗ), в том числе хлорорганические пестициды, гексахлобензол. Цель исследования – методическое обеспечение контроля содержания гексахлорбензола в биологических средах человека. 

Материал и методы. Для контроля гексахлорбензола в крови разработана газохроматографическая методика определения. Определение гексахлорбензола в крови основано на использовании капиллярной газовой хроматографии с режимом линейного программирования температуры колонки, детектора электронного захвата (ДЭЗ), экстракции органическим растворителем на этапе пробоподготовки. При реализации разработанной методики оценивали показатели – точность и характеристики погрешности результатов анализа. Нижний предел количественного определения (LOQ) гексахлорбензола в крови составил 0,000024 мкг/см³, при диапазоне определяемых концентраций от 0,00015 до 0,005 мкг/см³ (погрешность методики определения ≥20%), что позволяет адекватно диагностировать химическую нагрузку в крови высокотоксичного стойкого органического загрязнителя. 

Результаты. Показатели качества результатов количественного химического анализа гексахлорбензола в крови составили: точность (правильность и прецизионность) – 15,62%, повторяемость – 3,45%, воспроизводимость – 4,65%. В процессе апробации методики в крови обследуемой группы обнаружены концентрации гексахлорбензола в диапазоне 0,0003 ± 0,0001 ÷ 0,0007 ± 0,0001 мкг/см³. Высокая эффективность газохроматографического определения гексахлорбензола в образцах крови достигнута путём подбора оптимальных условий газохроматографического анализа: капиллярная колонка серии HP-1- 35м ∙ 0,32мм ∙ 0,25мкм с программированием температуры, оптимальной температуры испарителя и ДЭЗ. 

Заключение. Отработанный способ подготовки пробы крови к анализу, включающий жидкостную экстракцию толуолом, денатурации белка центрифугированием биосреды при 7000 об/мин в течение 15 мин при 
рН 6–7 в сочетании с газохроматографическим анализом и ДЭЗ позволил достичь полноты извлечения гексахлорбензола из крови на 99,7%.

1. Михеева А.Ю., Васильева И.А. Стойкие органические загрязнители в объектах окружающей среды. Методы определения. Вопросы аналитического контроля качества вод: Материалы X научно-практического семинара. С-Пб., 2005: 67-85.

2. Юдаев А.И. Полихлорированные бифенилы и диоксины- суперэкотоксиканты XXI века. Энергия: экономика, техника, экология, 2010; 1: 60-5.

3. Новицкий В.Ф., Новицкая Т.В., Потоцкий А.В., Санитарно-химическая оценка гептахлорэпоксида в объектах окружающей среды. Здоровье и окружающая среда, 2011; 19: 435-40.

4. Поздняков С.П., Румак B.C., Софронов Г.А., Уманова Н.В. Диоксины и здоровье человека. С-Пб., 2006: 273.

5. Regulation (EC) No 850/2004 of the European Parliament and of the council of 29 April 2004 on persistent organic pollutants and amending Directive 79/117/EEC. Available at: https://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri=OJ:L:2004:158:0007:0049:EN:PDF (accessed: 20.05.2018)

6. Иваненко Н.В. Экологическая токсикология. Под редакцией Н.Г. Маслянникова. М., 2006: 90

7. IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks for Humans. Lyon, 1991; 52: 473

8. Белясова Н.А. Биохимия и молекулярная биология. Минск: Книжный дом, 2004: 415.

9. Жеребцов Н.А., Попова Т.Н., Артюхов В.Г. Биохимия. Воронеж: Изд-во Воронежского государственного ун-та, 2002: 696.

10. Орлова О.И., Савельева Е.И., Радилов A.C. Применение биомониторинга для оценки характера и тяжести воздействия химического фактора. Медицина труда и промышленная экология, 2010; 12: 28-33.

11. Клюев Н.А., Курляндский Б.А., Ревич Б.А. и др. Диоксины в России. М.: ЮНЕП, 2001; 212.

12. Клюев Н.А., Бродский Е.С. Полихлорированные бифенилы. Супертоксиканты XXI века. Выпуск №5. М.: ВИНИТИ, 2000: 31-63.

13. Сперанская О., Цитцер О. Стойкие органические загрязнители. Available at: http://www.ipen.org/ipepweb1/library/ipep_pdf_reports/4rus%20russia%20counry%20situation%20report%20russian.pdf (дата обращения: 20.06.2018)

14. Михеева А.Ю. Унификация методов определения стойких органических загрязнителей. Вопросы аналитического контроля качества вод: Материалы XIII научно-практического семинара. М, 2008: 23.

15. Майстренко В.Н., Клюев Н.А. Эколого-аналитический мониторинг стойких органических загрязнителей. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2004: 323.

16. Зайцева Н.В., Май И.В., Клейн С.В., Ханхареев С.С., Болошинова А.А. Научно-методические аспекты и практический опыт формирования доказательной базы причинения вреда здоровью населения в зоне влияния отходов прошлой экономической деятельности. Гигиена и санитария, 2017; 96 (11): 1038-44.

17. Другов Ю.С. Экологическая аналитическая химия. С-Пб., АНАТОЛИЯ, 2000: 432.

18. Горюнова С.М., Исмаилова Р.Н., Фаттахов И.Г. Оптимизация системы метрологического обеспечения лаборатории по оценке качества проводимых измерений. Вестник Технологического университета. 2017; 20 (8): 120-3.

19. Гармаш А.В., Сорокина Н.М. Метрологические основы аналитической химии. Издание 3-е исправленное и дополненное. Москва: МГУ им. М.В. Ломоносова, 2012: 47.

20. Сеньюва Х. З., Гилберт Д. Простое руководство для пользователей по разработке и валидации методов; перевод с англ. А.В. Галкин. М., 2011: 43.

21. Shah V.P., Midha K.K., Dighe S., McGilveray I.J., Skelly J.P., Yacobi A., Layloff T., Viswanathan C.T., Cook C.E., McDowall R.D., Pittman K.A., Spector S. Analytical methods validation: bioavailability, bioequivalence and pharmacokinetic studies. Conference report. Pharm.Res. 1992; 9: 588-592

22. Аладышева Ж.И., Спицкий О.Р. Валиадция аналитических методик для производителей лекарств. Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств, подготовленное Федеральным Союзом Фармпроизводителей Германии (BAH). Под ред. В.В. Береговых. М., Литерра, 2008; 70

23. Bioanalytical Method Validation 05/24/18. U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration Center for Drug Evaluation and Research (CDER) Center for Veterinary Medicine (CVM). May 2018 Biopharmaceutics. Available at: https://www.yumpu.com/en/document/view/21736050/guidance-for-industry-bioanalytical-method-validation (accessed: 23.05.2018)

24. Михеева А.Ю., Васильева И.А., Семенов С.Ю., Сычев К.С. Применение многослойных колонок для проведения экспрессной адсорбционной очистки экстракта при определении хлорорганических пестицидов. Сорбционные и хроматографические процессы. 2009; 9 (1): 95-104.

25. Другов Ю.С., Родин А.А. Пробоподготовка в экологическом анализе. С-Пб.: АНАТОЛИЯ , 2002: 755.

26. Sychov C.S., Proskurina N.A., Davankov V.A., Mikheeva A.Yu. The Unique Selectivity of pi-Interactions for Solid-Phase Extraction. LCGC Europe, 2009; 22 (1): 20-7.

27. Hubert A., Wenzel K.D., Manz М. et al. High extraction efficiency for POPs in real contaminated soil samples using accelerated solvent extraction. Analytical Chemistry, 2000; 72 (6): 1294-3000.

28. Garcia-Rodriguez D., Carro-Diaz A.M., Lorenzo-Ferreira R.A. Supercritical fluid extraction of polyhalogenated pollutants from aquaculture and marine environmental samples. Jour. of Sep. Science, 2008; 31 (8): 1333-45. DOI: 10.1002/jssc.200700637

29. Карпов Ю.А., Савостин А.П. Методы пробоотбора и пробоподготовки. М.: Бином, 2003: 234.

30. Любач Н.В., Гринько А.П. Перечень методических указаний для определения пестицидов в различных объектах. Журнал Хроматографічного товарищества. 2005; 3: 43-51.